2016 - Mariane Roberta Ritter
MSc. Thesis
Autor/author: Mariane Roberta Ritter
Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas - Universidade Estadual de Maringá
Área do Conhecimento: Farmacognosia
Data de Defesa: 23 de março de 2016
Orientador: Prof. Dr. João Carlos Palazzo de Mello
Co-orientador: Prof. Dr.Celso Vataru Nakamura
Banca examinadora: Prof. Dr. Admilton Gonçalves de Oliveira Júnior
Prof. Dr. Renata Longhini
Título: Avaliação do potencial antimicrobiano in vitro de Trichilia catigua e caracterização química da fração oligomérica aquosa
Resumo: Trichilia catigua A. Juss. (Meliaceae) é uma árvore conhecida como "Catuaba" ou "Catiguá" e está amplamente distribuída no Brasil, sendo muito utilizada na medicina popular. Estudos realizados com as cascas de T. catigua sugerem que esta planta apresenta atividade antimicrobiana, antinociceptiva, afrodisíaca, antioxidante, antidepressiva e ação preventiva contra danos cerebrais. Este trabalho teve como objetivo a separação e caracterização da fração semipurificada aquosa obtida a partir das cascas de T. catigua mediante ressonância magnética nuclear (RMN) de 13C, cromatografia em coluna e eletroforese capilar, bem como o desenvolvimento metodológico. Além disso, foi realizadaatriagem microbiológica contra bactérias e fungos, sendo eles: Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Bacilus subtilis, Enterococcus faecium e Enterococcus faecium resistente a vancomicina (EFRV), Helicobacter pylori, Candida albicans, Candida parapsilosis, Candida tropicalis, Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum e Microsporum gypseym. As análises microbiológicas foram realizadas por meio da determinação da concentração inibitória mínima (CIM), sendo que para H. pylori também foi realizada turbidimetria e avaliação de atividade bactericida. Primeiramente foi produzido o extrato bruto (EB) de catuaba, que posteriormente foi particionado originando a fração acetato de etila (FAE) e fração aquosa (FAQ). Os métodos cromatográficos desenvolvidos para FAQ demonstraram eficácia na caracterização das proantocianidinas oligoméricas de T. catigua, sendo que o espectro de RMN de 13C sugeriu a presença de proantocianidinas e de cinchonaínas do tipo I e II como substâncias oligo ou mesmo poliméricas. Com relação à atividade antimicrobiana, os extratos apresentaram resultados expressivos principalmente para E. faecium e EFRVcom CIM de 312,5 a 156,5 µg/ml. Numa avaliação geral, a FAE demonstrou melhores resultados, principalmente para as cepas Gram-positivas e fungos. Na determinação turbidimétrica, a FAQ se mostrou promissora contra H. pylori. Os resultados obtidos sugerem que os extratos de T. catiguaapresentam potencial apliação como adjuvante ao tratamento e promissor ao desenvolvimento de novas drogas antimicrobianas.
Palavras-chave: Trichilia catigua, triagem microbiológica, métodos cromatográficos, leveduras, dermatófitos.
Title: Evaluation of in vitro antimicrobial potential of Trichilia catigua and chemical characterization of aqueous oligomeric fraction
Abstract: Trichilia catigua A. Juss. (Meliaceae) is a tree known as "Catuaba" or "Catiguá" and is widely distributed in Brazil and commonly used in folk medicine. Studies with the barks of Trichilia catigua suggest that this plant has antimicrobial, antinociceptive, aphrodisiac, antioxidant, anti-depressant activities and preventive action against brain damage. This study aimed to separation and characterization of aqueous semipurified fraction obtained from the barks of Trichilia catigua by nuclear magnetic resonance (NMR) 13C, column chromatography and capillary electrophoresis which was also carried out the methodological development. In addition, we performed the microbiological screening against bacteria and fungi, being them Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis, Enterococcus faecium and Enterococcus faecium vancomycin-resistant (EFVR), Helicobacter pylori, Candida albicans, Candida parapsilosis, Candida tropicalis, Trichophyton mentagrophytes,Trichophyton rubrum and Microsporum gypseym. Microbiological analyzes were performed by determining the minimum inhibitory concentration (MIC), and H. pylori was also conducted turbidimetry and evaluation of bactericidal activity. It was first produced the crude extract (CE) of catuaba, which was subsequently partitioned giving the ethyl acetate fraction (EAF) and aqueous fraction (AQF). The chromatographic methods developed to AQF demonstrated efficacy in the characterization of oligomeric proanthocyanidin of T. catigua, and the 13C NMR spectrum suggested the presence of proanthocyanidins and cinchonains type I and II as oligo or polymeric compounds. Regarding the antimicrobial activity, the extracts showed significant results especially for E. faecium and EFVR with MIC from 312,5 to 156,5 µg/ml. An overall assessment, the EAF has shown better results, especially for Gram-positive strains and fungi. In determining turbidity, the AQF has shown considerable promise against H. pylori. The results suggest that T. catigua extracts have potential application as an adjunct to treatment and promising to develop new antimicrobial drugs.
Keywords: Trichilia catigua, screening, chromatographic methods, yeast, dermatophytes.
Dissertação PDF: Mariane Roberta Ritter
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