2015 - Bruna Aparecida Alves Aguiar
MSc. Thesis
Autor/author: Bruna Aparecida Alves Aguiar
Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas - Universidade Estadual de Maringá
Área do Conhecimento: Farmacognosia
Data de Defesa: 24 de abril de 2015
Orientador: Prof. Dr. João Carlos Palazzo de Mello
Banca examinadora: Prof. Dr. Cleyton Eduardo Mendes de Toledo
Prof. Dra. Denise Brentan da Silva
Título : Estudos de controle de qualidade e fitoquímica do extrato e das frações obtidos de Paullinia cupana Kunth e sua atividade contra Helicobacter pylori
Resumo: Paullinia cupana Kunth, conhecida por guaraná, é uma planta brasileira nativa da Amazônia, sendo suas sementes de ampla utilização no mercado alimentício e farmacêutico. Diversas atividades biológicas têm sido descritas na literatura pelo uso de extratos brutos e suas frações semipurificadas. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a qualidade de dois diferentes lotes da planta, caracterizar quimicamente a fração semipurificada aquosa (FAQ) e avaliar a atividade do extrato bruto e frações semipurificadas sobre a bactéria Helicobacter pylori. A partir do extrato bruto de P. cupana (EBPC) prepararam-se as frações semipurificadas por partição com acetato de etila (EPA) e água (FAQ). Para o controle de qualidade, dos dois lotes de sementes, foram realizadas análises físico-químicas farmacopeicas da droga vegetal e análise do perfil químico via CLAE-DAD na fração EPA. Para análise do perfil químico da FAQ, foram realizados RMN 13C de sólidos e EM via infusão direta. Os resultados das análises físico-químicas para os lotes 1 e 2 foram, respectivamente: 32,75% e 29,71% em teor de extrativos; 1,87% e 1,42% de cinzas totais; 8,84% e 9,94% na perda por dessecação; 6,37% e 5,13% no doseamento de metilxantinas, e 9,62% e 9,25% no teor em polifenóis totais e a análise por CLAE-DAD mostrou semelhança no perfil químico dos lotes. O espectro de RMN 13C, no estado sólido, apresentou características de flavan-3-ol com sinais correspondentes às duas regiões fenólicas (anéis A e B); à ligação interflavonoides, características estas que sugerem a presença de taninos condensados (proantocianidinas). O espectro de massas demonstrou a presença de monômeros, dímeros, trímeros e tetrâmeros de procianidinas, além da presença de ácido cafeico e derivados. A avaliação biológica demonstrou que o extrato e frações não possuem forte atividade sobre Helicobacter pylori, mas uma atividade bacteriostática. Os resultados demonstram a qualidade e características do material vegetal utilizado no estudo e a presença de taninos condensados e ácido cafeico na FAQ do extrato de guaraná.
Palavras-chave: Paullinia cupana, ensaios farmacopeicos, proantocianidinas, ácido cafeico, Helicobacter pylori.
Title: Quality control and phytochemical evaluation of extract and fractions obtained from Paullinia cupana Kunth seeds and its activity against Helicobacter pylori
Abstract: Paullinia cupana Kunth, known as guarana, is a native Brazilian plant from the Amazon, and its seeds have wide use in the food and pharmaceutical market. Several biological activities have been described in the literature by using crude extracts and their semi-purified fractions. The objective of this study was to evaluate the quality of two different lots of the plant, chemically characterize the aqueous semipurified fraction (FAQ), and assess the activity of the crude extract and semipurified fractions against Helicobacter pylori. From the crude extract of P. cupanaa (EBPC) yielded the semipurified fractions in ethyl acetate (EPA) and water (FAQ). For quality control, of the two lots, pharmacopoeic analyses were made in plant drugs and analysis of chemical profile via HPLC-DAD was made in the EPA fraction. The chemical profile of the FAQ were performed by using 13C NMR and MS by direct infusion. The results of physico-chemical analyses for lots 1 and 2 were, respectively, 32.75% and 29.71% in extractives content; 1.87% and 1.42% of total ash; 8.84% and 9.94% loss on drying; 6.37% and 5.13% in the determination of methylxanthines, and 9.62% to 9.25% in total polyphenol content, and by HPLC-DAD showed similarity in the chemical profile of two lots. The solid 13C NMR spectrum showed characteristics of flavan-3-ol as signals corresponding to the two phenolic regions (rings A and B); bond of interflavonoids, these characteristics suggest the presence of condensed tannins (proanthocyanidins). The mass spectrum showed the presence of monomers, dimers, trimers and tetramers of procyanidins, and the presence of caffeic acid and derivatives. The biological evaluation showed that the extract and fractions do not have strong activity against Helicobacter pylori, but a bacteriostatic activity. The results demonstrate the quality and characteristics of the plant material used in the study and the presence of condensed tannins and caffeic acid in the FAQ guarana.
Keywords: Paullinia cupana, pharmacopeial assays, proanthocyanidins, caffeic acid, Helicobacter pylori.
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